Характеристика тестовых сывороток

Сыворотка Wiel (см. выделена в 1963 г. Chown и соавт. [227] из сы­воротки женщины, миссис Bill cD"E/cde, сенсибилизированной четырь­мя трансфузиями и беременностью плодом C^uD^ue/cde. Исходная сыворот­ка содержала антитела анти-С, анти-Се, анти-С^и, анти-V и анти-D^w (Wiel). Очищенные aHTH-Wiel-антитела были получены адсорбцией сопутствующих антител, а также элюцией aHTH-Wiel-антител с эритроцитов, принадлежащих донору Wiel с фенотипом c^uDe/cde. В тех случаях, когда говорят о сыворот­ке Bill, подразумевают цельную сыворотку, а когда о сыворотке анти-Wiel или анти-D^w -адсорбированную сыворотку или элюат, полученный из сыво­ротки Bill.

Сыворотка анти-Wiel реагирует с антигеном D^w лиц cD^we/cde, CD^we/cde и, по данным Tippett [657], - с антигеном V (ce^s) лиц D-анти-О категории D^v. С эритроцитами людей CD^we/CDe сыворотка анти-Wiel не реагировала, посколь­ку ген D в позиции trans формировал у этих лиц нормальный D-антиген. Теперь очевидно, что фактор Dennis является продуктом гена R^NM&

Сыворотка Troll найдена в 1958 г. у белой женщины с генотипом Cde/cde.

Причина сенсибилизации не установлена. Женщина имела 2 детей; трансфузий или инъекций крови ей не проводили. Сыворотка содержала антитела анти-С^х, анти-Wr³, анти-Тг^а, анти-Ву и антитела, обозначенные авторами как Troll-Reynolds. Чистые антитела анти-Troll были получены адсорбцией и элюцией. Они имели такую же специфичность, как и сыворотка Reynolds.

Сыворотка Reynolds найдена Harris в 1961 г. у женщины по имени Elva Reynolds с генотипом CDe/cDE, сенсибилизированной трансфузиями крови (бе­ременностей не было). Ее сыворотка содержала, помимо указанных атипичных антител, антитела анти-Лс^ь.

Наследование гена R^N

Ген R^N₉ названый так Rosenfield и соавт. [575], был обнаружен у женщины по имени Charlie By и у 3 из 6 ее детей, а также у ее брата и у 3 из 4 его детей. Другими словами, носителями этого гена были сестра и брат семьи By, кото­рые передали его детям. By были неграми, откуда и появился символ N в обо­значении этого гена. Далее он был описан в виде генного комплекса, который можно было интерпретировать как (C)D^u(e) с сомнительной продукцией антиге­нов С (rh^f) и е (hr").

Rosenfield и соавт. не использовали сыворотки Wiel, Troll и Reynolds. Однако позднее Tippett исследовала мать семьи By и одного из ее детей R^N+ и нашла, что оба они Troll положительны. Признак Troll + в этой семье был менее устойчив, чем ген R^N, однако сочетание этих редких признаков [слабый С, слабый е и Troll (Reynolds)-] не были взаимосвязаны.

Fred с соавт., а затем Rosenfield и соавт. исследовали семью Co-Gar: мать была Е-е+, ребенок - Е+е-. Позднее был установлен фенотип мужа и бабушки по линии матери. Все они, за исключением мужа, были Wiel+ Troll (Reynolds)+. Фенотип ре­бенка оказался таким же, как у Dennis'a и By, и все 3 человека были Тго11+.

Интересны их генотипы: муж CD^ue/cD^uE, мать C^ue^u/cDe, ребенок C^ue^u/cD^uE, бабушка C^ue^u/CD^ue. Характерно, что у ребенка антигены С и е слабые, у матери слабый С и, возможно, слабый е, который маскируется нормальным е, унаследованным от отца, имевшего, по-видимому, хромосо­му cde или cDe. У бабушки слабые антигены Сие маскировались нормаль­ными антигенами Cde.

При серологическом обследовании произвольно взятых лиц некоторые из них оказались Wiel/Troll/Reynolds-положительными:

Мистер Harper - донор-негр. Он был обследован, помимо упомяну­тых выше Chown и соавт. [224], другими исследователями, в том числе Race и Sanger. Его эритроциты имели антиген D, слабый С, Е, с, слабый е, Rh32. Антигена f они не содержали.

 Доктор Molthan исследовала нескольких доноров, родители которых относились к типу R^N. ТШегу была одним из них. Ее кровь содержала антиген D, Е, с, слабые Сие.

Миссис Novella Council - негритянка. При тщательном изучении ее эритро­цитов было установлено, что она не Cde/Cde, как считали ранее, a C^uD^ue/Cde и относится к типу R^N, подобно бабушке из семьи Co-Gar.

Редкий тип крови R^N обнаруживают в основном у негров, среди белых он встречается редко. Его не удалось выявить при обследовании 906 лиц белой расы и 1217 их детей.

Закономерен вопрос: не являлся ли ген Dennis геном R^N7 Проведено срав­нительное изучение крови Dennis'a и образцов крови с фенотипами Wiel+Troll (Reynolds)*, Wiel+Troll (Reynolds)- и Wiel-Troll (Reynolds)-. Образцы кро­ви Dennis'a, матери из семьи Co-Gar и донора ТШегу оказались Wiel+ Troll+ Reynolds+, из чего можно заключить, что ген Dennis идентичен гену R^N. Исследование крови другими сыворотками позволило сделать аналогичный вы­вод. В частности, эритроциты Dennis'a при исследовании их 6 сыворотками анти-С, 3 анти-Се и 1 анти-СЕ показали такие же результаты, как эритроциты матери из семьи Co-Gar, т. е. со всеми сыворотками анти-С не реагировали, с анти-Се реагировали, с анти-СЕ давали слабоположительную реакцию.

Адсорбция - элюция, выполненная в нескольких лабораториях, не опроверг­ла вывод о том, что гены Dennis и идентичны.

По мнению авторов, ген Dennis возник в результате мутации гена CD^ue, ко­торый приобрел способность инициировать наряду с антигенами CD^ue новый антиген - Troll.

Высказанная гипотеза могла быть подтверждена при обследовании потомков от брака Dennis'a и его супруги, которые могли нести ген R^N и содержать анти­гены Troll и Wiel.

Как отметили авторы, Dennis и его жена, имеющая генотип CD^ue/CD^ue, -выходцы из многодетных семей. Однако, несмотря на большое стремление су­пругов иметь детей, их брак на протяжении многих лет оставался бесплодным. Проведенные специальные исследования не позволили выяснить причину бес­плодия.

R^Har (Rh33)

Антиген Ro^Har (D^RoHar) получил свое название по имени донора Наг, эритроциты которого были использованы Giles и соавт. [306] для приготовления первой тесто­вой сыворотки aHTH-Rh33. Донор Наг был резус-отрицательным, однако его эри­троциты реагировали с некоторыми сыворотками анти-D и анти-DC. Элюат с эри­троцитов Наг после адсорбции одной из сывороток анти-D содержал анти-^^Наг-антитела, реагирующие с эритроцитами 2 из 1060 доноров (включая самого Наг).

Эритроциты D^RoHar имеют трудно выявляемую форму D-антигена, а также шиженное количество антигенов е, f, и Нг_о, не содержат часто встречающих­ся антигенов hr^s, G и Нг, то есть содержат набор серологически выявляемых фе-нотипических признаков, отличающих гаплотип R^oHar. В связи с этим антиген Rh33 считается маркером гаплотипа ЕЭш сыворотки aHra-Rh33 используют соответственно для идентификации лиц-носителей гаплотипа Л^ой^в гомо- и ге­терозиготной форме. Однако следует заметить, что не все 100 % лиц R_o^Har явля­ются Rh33+, бывают и исключения.

Антиген Rh33 встречается на эритроцитах с редкими фенотипами: D+G-, e+hr^s- и Нг +Нг-

Эритроциты R_o^Har при использовании обычных серологических методов ти-пируются как D-.

В литературе приведено 2 наблюдения анти-1ШЗ-антител. В одном случае эти антитела присутствовали в сыворотке в комбинации с анти-О-антителами [306], в другом - с антителами анти-D, анти-с, анти-V, анти-К и аутоантите-лами, мимикрирующими под аллоантитела анти-D [Issitt и соавт., Transfusion, 1986, V. 26, R 506]. В обоих случаях анти-РЪЗЗ-антитела удавалось выделить в виде моноспецифической фракции с помощью дифференциальной адсорбции.

По данным Beckers и соавт. [161], гаплотип R^oHar, обусловливающий выра­ботку антигена D^RoHar, инициирует продукцию частичного D-антигена катего­рии D^IV. При гаплотипе D^IV(C)- антиген D^RoHar также может вырабатываться. Эпитопный состав антигена D^RoHar(Rh33) представлен в табл. 4.14 и 4.16 в стро­ке D^RoIiar. Известен случай ГБН, вызванный антителами aHTH-Rh33. Лица с фе­нотипом R_o^Har легко вырабатывают анти-О-антитела [161].

Исследуя эритроциты D^RoIiar с помощью панели моноклональных анти-D-антител, Wallace и соавт. [697] пришли к выводу, что этот антиген кодируется гаплотипом (D)c(e) Rh33 и является парциальным. Авторы нашли, что при ука­занном гаплотипе не экспрессированы эпитопы epDl-epD4, epD8 и epD9, в то время как способность экспрессировать эпитопы epD5 и epD6/7 сохранена.

Антиген D у лиц D^RoHar отличается от других парциальных D-антигенов. В противоположность слабым D-антигенам, которые выявляются неполными IgG-антителами, а с полными IgM-антителами не реагируют, D-антиген на эритро­цитах D^RoHar хорошо реагирует с полными антителами и не реагирует с боль­шинством реагентов, содержащих неполные антитела. Wallace и соавт. [697] подтвердили эти данные, показав в своих исследованиях, что моноклональные антитела IgM лучше выявляют антиген D^Rotlar, чем IgG.

Как установлено молекулярно-биологическими исследованиями Beckers и соавт. [160, 161], продукция антигена D^RoHar обеспечивается геном RHce, в кото­ром экзон 5 замещен эквивалентным экзоном ДЯО-гена.

Riv(Rh45)

Антиген Riv обнаружен в 1983 г. Delehanty и соавт. [257] у людей с феноти­пом D^IV(C)-, с другими фенотипами антиген Riv не был найден.

Присутствие антигенов Go^a, Evans, D^w, BARC, Tar, Rh32, Rh33, Riv и др. (табл. 4.17) может быть использовано как признак того, что данные эри­троциты принадлежат к категории частичного D. Например, умчелове-ка с генотипом CD^Ive/cde парциальный 0^1У-антиген выявляют с помощью специфических сывороток aHTH-epD4-epD8. У человека с 1